| نوع مدرک: | متون چاپی |
| سرشناسه | صمدی ، ساجده، نویسنده |
| شماره بازیابی : | BIO microb 64 1403 |
| عنوان : | جداسازی پروبیوتیک و بررسی تأثیر مهاری آن روی باکتری استرپتوکوکوس اینیه |
| عنوان موازی : | Isolation of Probiotic and Investigation of its Inhibitory Effect on Streptococcus iniae |
| ناشر: | دانشگاه شهید اشرفی اصفهانی: اصفهان |
| سال نشر : | 1403 |
| صفحه شمار: | 76ص |
| شابک/شاپا | 25845 |
| یادداشت | پایان نامه کارشناسی ارشد: رشته میکروبیولوژی گرایش میکروارگانیسم¬های بیماری¬زا |
| شناسه افزوده : | قاسمی ، سید مهدی، استاد راهنما امامی ، حمید، استاد مشاور |
| توصیفگرها | استرپتوکوکوس اینیه، قزل آلای رنگین کمان، پروبیوتیک Streptococcus iniae, rainbow trout, probiotic |
| چکیده : | با توجه به افزایش روز افزون جمعیت و نیاز برای تأمین پروتئین مورد نیاز این جمعیت، زمینه لازم برای توسعه سیستم¬های مختلف پرورش آبزیان ایجاد شده است. ماهی قزل¬آلای رنگین کمان از جمله ماهیان سردابی است. یکی از مهمترین عوامل در بروز سپتمی سمی و تلفات جبران ناپذیر در مزارع پرورش ماهی قزل آلای رنگین کمان، باکتری استرپتوکوکوس اینیه میباشد که گاهی عامل ایجاد عفونت در انسان نیز می¬باشد. مصرف بی رویه آنتی¬بیوتیک¬ها توسط پرورش دهندگان برای درمان بیماری¬های باکتریایی امری رایج شده است که منجر به بروز مقاومت دارویی در جدایه¬های باکتریایی و نیز کاهش اثرات دارویی و تجمع دارو در عضلات ماهی و ایجاد خطرات زیست محیطی میشود. لذا یافتن روش های نوین برای به حداقل رساندن تلفات آبزیان پرورشی، کاهش خسارات اقتصادی و نیز کاهش مشکلات زیست محیطی ناشی از مصرف گسترده آنتی بیوتیک¬ها، امری ضروری به نظر می-رسد. در سال¬های اخیر، محققین به دنبال معرفی پروبیوتیک¬ها جهت افزایش راندمان تولید آبزیان بوده¬اند، زیرا علاقه فزاینده¬ای به استفاده از این ترکیبات طبیعی به عنوان مکمل¬های خوراکی امیدوارکننده برای افزایش مقاومت در برابر بیماری¬ها، نرخ رشد و تقویت سیستم ایمنی ماهی¬ها وجود داشته است. با توجه به مطالب ذکر شده هدف از این مطالعه تهیه استرپتوکوکوس اینیه و در مرحله بعد تأیید باکتری توسط واکنش PCR و در ادامه جداسازی باکتری¬های پروبیوتیک از منابع مختلف و بررسی تاثیر مهاری آن¬ها بر روی استرپتوکوکوس اینیه می-باشد.
باکتری استرپتوکوکوس اینیه از کلکسیون میکروبی سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران تهیه شد و طبق دستورالعمل شرکت کشت داده شد. تائید استرپتوکوکوس اینیه از لحاظ ماکروسکوپی، میکروسکوپی و تست¬های بیوشیمیایی انجام شد. بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه استاندارد استرپتوکوکوس اینیه با استفاده از روش آنتی بیوگرام انجام شد. به منظور بررسی کنترل زیستی و تاثیر مهاری پروبیوتیک¬ها بر روی استرپتوکوکوس¬ اینیه، باکتری¬های پروبیوتیک از منابع مختلف شامل چندین نمونه ماست صنعتی، چندین نمونه ماست سنتی، چندین نمونه پنیر و ... جداسازی و شناسایی شدند. کشت نمونه¬های جمع¬آوری شده بر روی محیط¬های کشتMRS آگار و جداسازی و خالص سازی آن¬ها انجام شد. به منظور تشخیص پروبیوتیک جداسازی شده شناسایی میکروسکوپی، ماکروسکوپی و آزمایشات بیوشیمیایی انجام شد. ارزیابی توانایی رشد سویه ها درتست تحمل نمک صفراوی، تست تحمل اسید و بررسی فعالیت همولیتیک پروبیوتیک های جداسازی شده انجام شد. غربالگری جدایه¬های باکتریایی از نظر فعالیت مهارکنندگی بر روی استرپتوکوکوس اینیه در محیط کشت جامد انجام شد. جهت تشخیص قطعی استرپتوکوکوس اینیه واکنش PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصیTOX1 و TOX2 مربوط به ژن لاکتات اکسیداز در ژنوم استرپتوکوکوس اینیه انجام شد. جهت شناسایی قطعی باکتری پروبیوتیک جداسازی شده PCR ژن 16SrRNA انجام شد.
استرپتوکوکوس اینیه به تمام آنتی¬بیوتیک¬های مورد استفاده به غیر از پنی¬سیلین مقاومت نشان داد. 8 نمونه پروبیوتیک از منابع مختلف جداسازی و خالص سازی شد. جدایه 3 بیشترین اثر ضدمیکروبی (قطر هاله 15 میلی متر) را بر روی استرپتوکوکوس اینیه داشت. از این جدایه برای ادامه مراحل آزمایش استفاده شد. نتیجه جستجوی توالی قطعات تکثیر شده در بانک ژنی NCBI نشان دهنده آن بود که باکتری Lactococcus lactis می¬باشد. سویه پروبیوتیک منتخب لاکتوکوکوس لاکتیس (جدایه¬ 3) قادر به رشد در هر سه pH اسیدی 5/1، 3، و 5/4 بود و قدرت تحمل صفرا را داشت. همچنین کاتالاز منفی و همولیز منفی بود.
باکتری¬های پروبیوتیک از طریق مکانیسم¬های مختلف، از جمله کاهش pH، رقابت برای گیرنده¬های سلولی و تولید ترکیبات ضد میکروبی (مانند باکتریوسین¬ها، اسیدهای لاکتیک و استیک، پراکسید هیدروژن، استالدئید و آمونیاک) می¬توانند بر متابولیسم باکتری¬ها یا تولید سم تأثیر بگذارند و اثرات مهاری بر بسیاری از میکروارگانیسم¬ها نشان دهند |
| لینک ثابت رکورد: | ../opac/index.php?lvl=record_display&id=14681 |
| زبان مدرک : | فارسی |
جداسازی پروبیوتیک و بررسی تأثیر مهاری آن روی باکتری استرپتوکوکوس اینیه (1403) / صمدی ، ساجده، نویسنده