| نوع مدرک: | متون چاپی |
| سرشناسه | دهقان ، انسیه، نویسنده |
| شماره بازیابی : | BIO microb I 25 1403 |
| عنوان : | تولید میکروبی آنزیم آسپاراژیناز و تاثیر آن بر سلول های سرطانی |
| عنوان موازی : | Microbial production of asparaginase enzyme and its effect on cancer cells |
| ناشر: | دانشگاه شهید اشرفی اصفهانی: اصفهان |
| سال نشر : | 1403 |
| صفحه شمار: | 72ص |
| شابک/شاپا | 25856 |
| یادداشت | پایان نامه کارشناسی ارشد :رشته میکروبیولوژی گرایش صنعتی |
| شناسه افزوده : | جلیلی ، مریم السادات، استاد راهنما امتیازی ، گیتی، استاد راهنما |
| توصیفگرها | آنزیم ال-آسپاراژیناز، آسپاراژین، سلول سرطانی، انتروباکتر،کلبسیلا L-asparaginase enzyme, asparagine, cancer cell, Enterobacter, Klebsiella |
| چکیده : | در سالهای اخیر، نیاز تحقیقات در تولید آنزیم ال-آسپاراژیناز به علت خواص درمانی آن افزایش یافته است. آسپاراژیناز دارویی است که در درمان انواع خاصی از سرطان، به ویژه لوسمی لنفوبلاستیک حاد (ALL) استفاده می شود. این دارو به دسته ای از داروها به نام آنزیم ها تعلق دارد که با کاهش سطح آسپاراژین، رشد و بقای سلول های سرطانی، را مهار می کند. هم اکنون ال-آسپاراژیناز تجاری از اشریشیا و انتروباکتر بدست میایدکه برای درمان مورد استفاده قرار میگیرد. از انجایی که تولید ان فعلا مقرون به صرفه نمی باشد، تحقیقات بر روی تولید و کلون کردن آن توسعه یافته است. در این تحقیق از منابع مختلف مانند پیله کرم ابریشم،مارچوبه، جو جوانه زده، برگ درخت شاه توت، آب دریا و خاک باغچه اقدام به غربالگری سویه تولیدکننده و میزان تولید آنزیم در سویۀ منتخب بررسی گردید. ابتدا نمونه های جمع اوری شده در محیط M9کشت گردید و کلنی صورتی انتخاب شد و سویهها از نظر میزان رشد بهتر در محیطکشت مایع غربالگری شدند. در مطالعۀ حاضر، جدایه ی A1r جداشده از کرم ابریشم بیشترین تغییر رنگ (زرد به صورتی) در محیط M9 حاوی فنول را ایجاد کرد.
نتیجه تعیین توالی جدایه ها و بلاست آنها با استفاده از سایت NCBI نشان داد جدایه ی A1r جداشده از کرم ابریشم بیشترین شباهت (95%) بهEnterobacter chengduensis و جدایهی Spa جداشده از مارچوبه بیشترین شباهت را به گونه کلبسیلا (Klebsiella sp) و همچنین جدایهTH جدا شده از جو جوانه زده بیشترین شباهت را به کلبسیلا (Klebsiella sp) دارد که این جدایه ها به عنوان سویۀ مولد ال-آسپاراژیناز در پایگاه اطلاعاتی NCBI به ترتیب با شماره دسترسی های PQ836623.1 و PQ837715.1 و PV168969 ثبت شدند.
تاثیر سوپرناتانت سلولی جدایه A1r جدا شده از پیله کرم ابریشم با فعالیت آنزیمی معادلU/ml/min 0.3(در شرایط بدون هوادهی و دمای 30 درجه سلسیوس و گلوکز و آسپاراژین به عنوان منبع کربن و نیتروژن) بر روی سلول های سرطانی Hela بررسی شد. نتایج نشان داد که این سوپرناتانت حاوی انزیم اسپاراژیناز توانسته 25 درصد از این سلول های سرطانی را از بین ببرد. و باتوجه به فعالیت آنزیمی قابل توجه ال-آسپاراژیناز خارجسلولی تولیدشده توسط این سویه، و اثر کشندگی بر روی سلول های سرطانی، جدایه ی Enterobacter strain A1r بهعنوان سویهای قوی در تولید آنزیم ال-آسپاراژیناز معرفی شد. و همچنین بر اساس مطالعات انجام گرفته در این تحقیق جدایه های کلبسیلا نخستین بار به عنوان سویه ی مولد ال-آسپاراژیناز معرفی شده است.
در این پژوهش ژن های ال-آسپاراژیناز موجود در جدایه های A1r و Spa و Escherichia coli با شماره IBRC: 10698 با استفاده از پرایمر های اختصاصی طراحی شده و تکنیک پی سی آر و سایت NCBI مورد بررسی قرار گرفتند که بعد از الاین شدن این ژن ها دریافت شد که ژن آسپاراژیناز جداشده از سویه A1r با ژن آسپاراژینازموجود در Enterobacter cloace به میزان 99% و ژن آسپاراژیناز جداشده از سویه Spa با ژن آسپاراژیناز موجود در Klebsiella michiganensis به میزان 99% و ژن آسپاراژیناز جداشده از Escherichia coli IBRC: 10698 با ژن آسپاراژیناز موجود در strain HS4 E.coliبه میزان 100% تطابق دارد |
| لینک ثابت رکورد: | ../opac/index.php?lvl=record_display&id=14692 |
| زبان مدرک : | فارسی |
تولید میکروبی آنزیم آسپاراژیناز و تاثیر آن بر سلول های سرطانی (1403) / دهقان ، انسیه، نویسنده