نوع مدرک: | متون چاپی |
سرشناسه | دهقانی ، معصومه، نویسنده |
ردهبندی کنگره : | BIO microb I 1 1400 |
عنوان : | جداسازی و شناسایی سویههای بومی باسیلوس تورنجینسیس تولیدکننده سم پروتئینی با قابلیت از بین بردن آفات گلخانهای و بهینهسازی تولید اسپور |
عنوان موازی : | Isolation and identification of native toxin producing strains of Bacillus thuringiensis against greenhouse pests and optimizing spore production |
ناشر: | دانشگاه شهید اشرفی اصفهانی: اصفهان |
سال نشر : | 1400 |
صفحه شمار: | خ،74ص |
شابک/شاپا | 24112 |
یادداشت | پایان نامه کارشناسی ارشد: پایان نامه کارشناسی ارشد میکروبیولوژی گرایش میکروبیولوژی صنعتی |
شناسه افزوده : | جلیلی طبایی زواره ، مریم السادات، استاد راهنما میرباقری فیروزآبادی ، مریم السادات، استاد راهنما امینی ، ریحانه، استاد مشاور |
توصیفگرها | باسیلوس تورنجینسیس پارااسپورال بادی جدایه های بومی آفات گلخانه ای Bacillus thuringiensis parasporal Body Native isolates Greenhouse pests |
چکیده : | یکی از رقبای جدی در امر تولید بهتر و بیشتر محصولات کشاورزی، حشرات هستند. باسیلوس تورنجینسیس، یک باسیل اندوسپوردار گرم مثبت و بیهوازی اختیاری است که بهعنوان حشرهکش بیولوژیک در کشاورزی مورد توجه بوده و مزیت¬های زیادی از جمله اثر اختصاصی بر روی آفات، نداشتن اثرات مضر روی انسان، محیط زیست و حشرات غیرهدف، هزینه کم، و کاربرد راحت نسبت به انواع شیمیایی دارا میباشد. این باکتری، قادر به تولید انواع مختلفی از توکسینها می باشند. در این تحقیق با هدف جداسازی سویههای بومی باسیلوس تورنجینسیس دارای اثرات حشرهکشی بر ضد آفات گلخانهای از خاک مناطق مختلف گلخانهای در اطراف اصفهان نمونهبرداری شد و با استفاده از روش انتخابی استات سدیم ، جداسازی سویهها صورت گرفت. سپس شناسایی سویهها و غربالگری اولیه بر اساس تستهای بیوشیمیایی و مشاهده کریستالهای توکسین انجام شد. شناسایی مولکولی سویهها با استفاده از PCR با پرایمرهای یونیورسال وتعیین توالی ژن 16S rDNAانجام شد و برای شناسایی ژنهای سنتزکننده کریستالهای پروتئینی برعلیه آفات گلخانهای از روش مولکولی و پرایمرهای اختصاصی gral-nem و CU استفاده شد. بهینهسازی تولید اسپور بر روی سویههای انتخابی و سویه باسیلوس تورنجینسیس استاندارد (PTCC 1494) با استفاده از منابع کربن (گلوکز، پساب نشاسته ای کارخانه چیپس، ملاس و گلیسرول) و منابع نیتروژن (عصاره مخمر، خیسانده ذرت و سولفات آمونیوم) و نمکهای معدنی (آب خلیج فارس، نمک آب آکواریوم مخصوص ماهی های آب شور) انجام شد. در پایان، پتانسیل بیوتکنولوژیکی سویه های مزبور از نظر تولید آنزیمهای هیدرولازی پروتئاز، کیتیناز، لیپاز، آمیلاز و لسیتیناز، مورد بررسی قرار گرفت. از 50 نمونه خاک مورد بررسی،70 سویه باسیلوس جداسازی شدند که در غربالگری بر اساس خصوصیات فنوتیپی و مشاهده کریستالهای پروتئینی با رنگ آمیزی کوماسی برلیانت بلو بوسیله میکروسکوپ فاز کنتراست، 20سویه انتخاب شدند. ژنهای اختصاصی با خاصیت حشره کشی بر علیه پروانه سانان، نیم بالان، دوبالان، قاب بالان، پرده بالان در سویه A با طول 180-200جفت باز و ژن های اختصاصی با خاصیت حشره کشی برعلیه نماتودها، پرده بالان، در سویه58 با طول تقریبی 489-474 جفت باز، به ترتیب شناسایی شدند. نتایج شناسایی مولکولی نشان داد که سویه A و 58 بیشترین شباهت را به سویه باسیلوس تورنجینسیس دارا می باشد. بهینه سازی در سویه های A ، 58 و1494، نشان داد که منبع کربن پساب نشاسته ای کارخانه چیپس ، منبع نیتروژن عصاره مخمر و املاح معدنی آب خلیج فارس بهترین منابع برای هر سه سویه بودند. همچنین هر سه سویه فعالیت هیدرولازی خوبی نشان دادند |
لینک ثابت رکورد: | ../opac/index.php?lvl=record_display&id=13261 |
زبان مدرک : | فارسی |